200 mM sodium orthovanadate (활성화) 만드는 법
티로신 인산가수분해효소를 막는 phosphatase inhibitor입니다. 끓여서 "활성화"해야 제대로 작동합니다. 용해 완충액에 최종 1 mM(1:200).
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Sodium orthovanadate (Na₃VO₄) | 368 mg | 200 mM |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 물(최종 부피의 약 90%)에 녹이고 pH를 10.0으로 맞춥니다 (HCl을 넣으면 노랗게 변함).
- 색이 없어질 때까지 끓이고 (약 10분) 실온으로 식힙니다.
- pH를 다시 10.0으로 맞추고, pH가 변하지 않고 색이 없을 때까지 끓이기–식히기를 되풀이합니다 (보통 3–5번).
- 최종 부피를 맞추고 나눠서 −20 °C에 보관합니다.
알아 둘 점
- 활성화는 vanadate 중합체(노란색)를 깨서 단량체(무색)로 만드는 과정입니다. 단량체만 효소를 막습니다.
- 세린/트레오닌 인산가수분해효소 억제에는 NaF(최종 10–50 mM)·β-glycerophosphate를 함께 씁니다.
⚠ 안전 vanadate는 독성이 있습니다. 장갑을 끼세요.
자주 묻는 질문
녹인 뒤 다시 노랗게 변했어요.
중합체가 다시 생긴 것입니다. 한 번 더 끓여 무색으로 만들어 쓰거나 새로 만드세요.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.