5% BSA blocking 용액 (TBST) 만드는 법
인산화 단백질 항체처럼 탈지분유가 맞지 않을 때 쓰는 blocking·항체 희석 용액입니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| BSA (fraction V) | 2.5 g | 5% (w/v) |
| TBST | 필요한 만큼 | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- TBST 위에 BSA를 뿌리고 천천히 녹입니다 (vortex 금지).
- 최종 부피를 맞추고 그날 쓰거나 4 °C에 1–2일 둡니다.
알아 둘 점
- 탈지분유에는 인산화 단백질(카제인)과 biotin이 있어 인산화 항체·streptavidin 검출을 방해합니다.
- 항체를 희석해 여러 번 쓰려면 0.02% sodium azide를 넣고 4 °C에 둡니다 (HRP 2차 항체에는 넣지 않음).
자주 묻는 질문
분유와 BSA 중 무엇이 blocking이 잘 되나요?
분유가 싸고 배경을 더 잘 줄이는 경우가 많습니다. 항체 설명서(datasheet)에 적힌 조건을 먼저 따르세요.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.