SDS-PAGE 전기영동 완충액 (Tris-glycine-SDS) 만드는 법
SDS-PAGE 전기영동 탱크에 채우는 완충액입니다. 1X 조성은 25 mM Tris, 192 mM glycine, 0.1% SDS (pH 약 8.3, 따로 맞추지 않음).
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Tris base | 30.3 g | 25 mM |
| Glycine | 144 g | 192 mM |
| SDS | 10 g | 0.1% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
진한 stock(예: 10X)은 모든 성분을 그 배수만큼 넣습니다. 쓸 때 1X로 묽히세요.
만드는 순서
- Tris와 glycine을 약 80% 물에 녹입니다.
- SDS를 넣고 거품이 나지 않게 살살 섞습니다.
- 물로 최종 부피를 맞춥니다. pH는 맞추지 않습니다.
알아 둘 점
- pH를 HCl로 맞추면 이온 조성이 바뀌어 밴드가 흐트러집니다.
- 10X stock에서 SDS가 석출되면 데워 녹인 뒤 묽힙니다.
자주 묻는 질문
완충액을 다시 써도 되나요?
안쪽(위) 칸은 매번 새로, 바깥 칸은 1–2번 재사용하는 연구실도 있습니다. 밴드가 휘거나 느려지면 새로 만드세요.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.