NP-40 용해 완충액 만드는 법
RIPA보다 부드러운 세포질·막 단백질 용해 완충액입니다. 50 mM Tris-HCl pH 8.0, 150 mM NaCl, 1% NP-40.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl (pH 8.0) | 2.5 mL | 50 mM |
| 5 M NaCl | 1.5 mL | 150 mM |
| NP-40 (또는 IGEPAL CA-630) | 500 µL | 1% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 물에 Tris·NaCl stock과 NP-40을 넣고 천천히 섞습니다.
- 물로 최종 부피를 맞춥니다.
- 4 °C에 보관합니다.
- 쓰기 직전에 protease inhibitor(필요하면 phosphatase inhibitor)를 넣습니다.
알아 둘 점
- 핵 단백질은 잘 녹지 않습니다. 전체 단백질이 필요하면 RIPA를 쓰세요.
자주 묻는 질문
Co-IP에도 쓰나요?
네. SDS·deoxycholate가 없어 단백질 결합이 잘 유지됩니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.