TFB2 (RbCl competent cell 용액 2) 만드는 법
RbCl 방법의 두 번째 용액으로, 세포를 풀어 나눠 얼립니다. 10 mM MOPS pH 6.5, 75 mM CaCl₂, 10 mM RbCl, 15% glycerol.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| MOPS (자유산) | 209 mg | 10 mM |
| CaCl₂·2H₂O | 1.103 g | 75 mM |
| RbCl | 121 mg | 10 mM |
| Glycerol | 15 mL | 15% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 최종 부피의 약 80% 물에 녹입니다.
- KOH로 pH 6.5를 맞춥니다.
- 물로 최종 부피를 맞춥니다.
- 0.22 µm 필터로 거릅니다. 4 °C 보관.
알아 둘 점
- 세포를 TFB2에 풀고 얼음 위에서 50–100 µL씩 나눠 액체질소나 드라이아이스로 바로 얼려 −80 °C에 둡니다.
자주 묻는 질문
효율은 어떻게 확인하나요?
pUC19 같은 plasmid 10 pg–1 ng으로 형질전환해 colony 수 ÷ µg DNA를 계산합니다 (좋으면 10⁷–10⁸/µg).
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.