면역형광 투과 용액 (0.25% Triton X-100) 만드는 법
PFA로 고정한 세포에 구멍을 내 항체가 세포 안으로 들어가게 합니다. PBS + 0.25% Triton X-100, 실온 10분.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 10% Triton X-100 | 1.25 mL | 0.25% |
| 1X PBS | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- PBS에 10% Triton stock을 넣어 섞습니다.
- 4 °C에 보관합니다 (몇 주).
- 고정·세척한 세포에 넣고 실온 10분 두었다가 PBS로 씻습니다.
알아 둘 점
- 막 단백질처럼 막 구조를 지켜야 하면 0.1% saponin(가역적, 모든 용액에 계속 넣음)을 씁니다.
- 차가운 메탄올로 고정했다면 이미 투과되어 이 단계가 필요 없습니다.
자주 묻는 질문
Triton 농도는 어떻게 정하나요?
0.1–0.5% 범위에서 핵 단백질은 높게, 세포질·세포골격은 낮게 시작합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.