4% PFA (파라포름알데히드) 고정액 만드는 법
세포·조직 면역염색 전에 단백질을 제자리에 고정하는 용액입니다. PBS에 4% 파라포름알데히드.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Paraformaldehyde (가루) | 4 g | 4% (w/v) |
| 1X PBS | 필요한 만큼 | 최종 부피까지 |
| 1 N NaOH | 필요한 만큼 | 녹을 때까지 몇 방울 |
만드는 순서
- 흄후드에서 PBS 약 80%를 60 °C로 데웁니다 (끓이지 않기).
- PFA 가루를 넣고 1 N NaOH를 몇 방울씩 넣으며 투명해질 때까지 젓습니다.
- 식힌 뒤 pH 7.2–7.4로 맞추고 PBS로 최종 부피를 맞춥니다.
- 필터로 거르고 4 °C에서 1주 안에 쓰거나 나눠 −20 °C에 얼립니다.
알아 둘 점
- 앰풀로 파는 16% 메탄올 없는 포름알데히드를 PBS로 4배 묽혀 쓰면 간편하고 일정합니다.
⚠ 안전 PFA·포름알데히드는 독성이 있고 발암 가능 물질입니다. 반드시 흄후드에서 장갑·보안경을 쓰고 다루세요.
자주 묻는 질문
포르말린과 PFA는 같은가요?
포르말린은 37% 포름알데히드 용액(메탄올 포함)이고, PFA는 그 고체 형태를 녹여 메탄올 없이 만든 것입니다. 형광 단백질 보존에는 메탄올 없는 PFA가 낫습니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.