HotSHOT 알칼리 용해액 만드는 법
조직을 알칼리에서 끓여 30분 만에 genotyping PCR용 DNA를 얻는 방법의 첫 용액입니다. 25 mM NaOH, 0.2 mM EDTA.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 10 M NaOH | 250 µL | 25 mM |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 40 µL | 0.2 mM |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 물에 NaOH와 EDTA를 넣고 섞습니다 (실온 보관).
- 조직 1–2 mm에 75 µL를 넣고 95 °C에서 30분 가열합니다.
- 식힌 뒤 같은 부피(75 µL)의 중화액을 넣고, 상등액 1–2 µL를 PCR에 씁니다.
자주 묻는 질문
DNA 양이 적지 않나요?
정제한 DNA보다 적고 순도도 낮지만, 짧은 genotyping PCR 산물(<1 kb)에는 충분합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.