2% CTAB 추출 완충액 (식물 DNA) 만드는 법
다당류가 많은 식물·곰팡이 조직에서 DNA를 뽑는 완충액입니다. 2% CTAB, 100 mM Tris pH 8.0, 20 mM EDTA, 1.4 M NaCl, 0.2% β-ME.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| CTAB | 2 g | 2% |
| 1 M Tris-HCl (pH 8.0) | 10 mL | 100 mM |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 4 mL | 20 mM |
| NaCl | 8.18 g | 1.4 M |
| β-mercaptoethanol (쓰기 직전) | 200 µL | 0.2% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- Tris·EDTA·NaCl을 물에 녹이고 CTAB을 넣어 60 °C에서 저어 녹입니다.
- 최종 부피를 맞추고 실온에 보관합니다.
- 쓰기 직전에 β-ME를 넣고 65 °C로 데워 곱게 간 조직에 넣습니다.
알아 둘 점
- 폴리페놀이 많은 식물은 PVP 1–2%를 함께 넣으면 DNA가 갈색으로 변하지 않습니다.
- 이후 chloroform:isoamyl alcohol(24:1) 추출 → 이소프로판올 침전으로 이어집니다.
⚠ 안전 CTAB 가루는 자극성이 있고, β-ME는 독성이 있습니다. 흄후드에서 다루세요.
자주 묻는 질문
CTAB이 차가운 곳에서 굳었어요.
정상입니다. 15 °C 아래에서 석출되니 데워 녹여 쓰세요.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.