웨스턴 블랏 stripping 완충액 (약한 조건) 만드는 법
한 번 검출한 막에서 항체를 떼어 다른 항체로 다시 보기(re-probe) 위한 약산성 완충액입니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Glycine | 7.5 g | 200 mM |
| SDS | 500 mg | 0.1% |
| Tween-20 | 5 mL | 1% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- Glycine과 SDS를 물 약 800 mL에 녹이고 Tween-20을 넣습니다.
- HCl로 pH 2.2를 맞추고 1 L로 맞춥니다.
- 막을 실온에서 5–10분씩 두 번 담그고 PBS·TBST로 충분히 씻은 뒤 다시 blocking합니다.
알아 둘 점
- stripping 할 때마다 단백질도 조금씩 빠집니다. 정량 비교는 같은 막의 stripping 전후로 하지 않는 것이 좋습니다.
- 떼어 냈는지 확인하려면 ECL만 다시 뿌려 신호가 없는지 봅니다.
자주 묻는 질문
잘 안 떨어지면?
β-ME와 SDS를 넣은 강한 조건(50 °C)이 있지만 단백질 손실도 큽니다. PVDF 막이 여러 번 stripping에 더 잘 견딥니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.