ELISA 정지 용액 (2 N H₂SO₄) 만드는 법
TMB 반응을 멈추고 파란색을 노란색으로 바꿔 450 nm에서 읽게 합니다. 2 N(1 M) 황산, 기질과 같은 부피로 넣습니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 진한 황산 (95–98%, 약 18 M) | 5.43 mL | 1 M (2 N) |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 최종 부피의 약 80% 물을 유리 용기에 먼저 넣고 얼음물에 담급니다.
- 흄후드에서 진한 황산을 아주 천천히 저으며 넣습니다 (열이 많이 남, 산을 물에).
- 식은 뒤 물로 최종 부피를 맞추고 유리병에 실온 보관합니다.
알아 둘 점
- 정지 후 30분 안에 450 nm(기준 540 또는 570 nm)를 읽습니다.
- 1 N HCl도 정지 용액으로 쓸 수 있습니다.
⚠ 안전 진한 황산은 매우 부식성이고 물과 섞으면 끓어오를 수 있습니다. 보안경·장갑·실험복을 쓰고, 절대 산에 물을 붓지 마세요.
자주 묻는 질문
정지 전에 읽으면 안 되나요?
파란색 그대로 650 nm에서 읽을 수 있지만 신호가 계속 변합니다. 정지하면 값이 고정되고 약 2–3배 커집니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.