1.5 M Tris-HCl pH 8.8 (분리젤 완충액) 만드는 법
SDS-PAGE 분리젤(아래 젤)에 넣는 완충액입니다. 젤 10 mL에 2.5 mL씩 들어갑니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Tris base | 45.42 g | 1.5 M |
| 진한 염산 | 필요한 만큼 | pH 8.8이 될 만큼 |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- Tris base를 최종 부피의 약 70% 물에 녹입니다.
- 실온에서 HCl로 pH 8.8을 맞춥니다.
- 물로 최종 부피를 맞춥니다.
- 필터로 거르고 4 °C에 보관합니다.
알아 둘 점
- 일부 실험실은 여기에 SDS 0.4%를 넣은 "4X 분리젤 완충액"을 씁니다. 그러면 젤을 만들 때 10% SDS를 따로 넣지 않습니다.
자주 묻는 질문
pH를 8.8로 꼭 맞춰야 하나요?
네. 분리젤과 농축젤의 pH 차이가 단백질을 얇은 띠로 모으는 원리(불연속 완충계)라서 pH가 틀리면 밴드가 번집니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.