PBS (인산완충식염수) 만드는 법
세포 세척, 희석, 항체 반응 등 가장 많이 쓰는 등장성 완충액입니다. 1X 조성은 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na₂HPO₄, 1.8 mM KH₂PO₄, pH 7.4입니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| NaCl | 8 g | 137 mM |
| KCl | 200 mg | 2.7 mM |
| Na₂HPO₄ (무수) | 1.44 g | 10 mM |
| KH₂PO₄ | 240 mg | 1.8 mM |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
진한 stock(예: 10X)은 모든 성분을 그 배수만큼 넣습니다. 쓸 때 1X로 묽히세요.
만드는 순서
- 모든 성분을 최종 부피의 약 80% 물에 녹입니다.
- pH를 7.4로 맞춥니다 (10X는 1X로 묽혔을 때 7.4가 되도록 만드는 경우가 많음).
- 물로 최종 부피를 맞춥니다.
- 고압멸균(121 °C, 20분)하거나 필터로 거르고 실온 보관합니다.
알아 둘 점
- Na₂HPO₄·7H₂O를 쓰면 1X 1 L에 2.68 g, 이수화물(·2H₂O)이면 1.78 g입니다.
- 10X PBS는 차가운 곳에서 인산염이 석출될 수 있습니다. 데워 녹인 뒤 쓰세요.
- 세포 배양용은 Ca²⁺·Mg²⁺가 없는 PBS(DPBS −/−)를 trypsin 전에 씁니다.
자주 묻는 질문
PBS와 DPBS는 무엇이 다른가요?
DPBS(Dulbecco's PBS)는 인산염 농도가 약간 다르고 Ca²⁺·Mg²⁺를 넣은 형태도 있습니다. 세척·희석에는 둘 다 쓸 수 있지만 세포를 떼어 낼 때는 Ca²⁺·Mg²⁺가 없는 것을 씁니다.
PBS 대신 TBS를 써야 할 때는?
인산이 알칼리 인산분해효소(AP) 검출이나 인산화 단백질 항체와 간섭할 수 있을 때 TBS를 씁니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.