PEI 1 mg/mL (linear, 25 kDa) transfection 시약 만드는 법
값싸고 효율 좋은 transfection 시약입니다. HEK293 계열 세포의 바이러스·단백질 생산에 많이 씁니다. DNA : PEI = 1 : 3 (무게).
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Linear PEI (MW 25,000) | 50 mg | 1 mg/mL |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- PEI를 물(최종 부피의 약 80%)에 넣고 HCl로 pH 2 가까이 낮춰 녹입니다 (또는 60–80 °C로 데움).
- 다 녹으면 NaOH로 pH 7.0으로 맞추고 최종 부피를 맞춥니다.
- 0.22 µm 필터로 거릅니다. 나눠서 −20 °C(또는 −80 °C) 보관.
알아 둘 점
- DNA와 PEI를 각각 혈청 없는 배지에 묽혀 섞고 15–20분 두었다가 세포에 넣습니다.
- 녹인 stock은 4 °C에서 몇 주, 여러 번 얼리고 녹이면 효율이 떨어집니다.
자주 묻는 질문
branched PEI와 같은가요?
아닙니다. 대부분의 transfection 방법은 linear 25 kDa(또는 40 kDa 염산염)를 기준으로 합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.