10X PCR 완충액 (Taq용) 만드는 법
Taq DNA polymerase의 고전적인 10X 반응 완충액입니다. 100 mM Tris-HCl pH 8.3, 500 mM KCl, 15 mM MgCl₂.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl (pH 8.3) | 1 mL | 100 mM (10X) |
| 1 M KCl | 5 mL | 500 mM (10X) |
| 1 M MgCl₂ | 150 µL | 15 mM (10X) |
| 핵산분해효소 없는 물 | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 모든 성분을 핵산분해효소 없는 물과 섞습니다.
- 필터로 거르고 나눠서 −20 °C에 보관합니다.
- PCR 반응 부피의 1/10을 넣습니다 (최종 1.5 mM MgCl₂).
알아 둘 점
- MgCl₂를 뺀 완충액을 만들고 따로 1.5–3 mM 범위에서 조절하면 최적화가 쉽습니다.
- 옛 조성에는 0.01% 젤라틴이 들어가기도 합니다.
자주 묻는 질문
다른 polymerase에도 쓰나요?
아닙니다. 고충실도 효소(Pfu·Q5 계열 등)는 각자 전용 완충액을 씁니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.