PBS-EDTA (0.5 mM, 효소 없는 세포 분리액) 만드는 법
trypsin 없이 세포를 떼어 내거나 표면 단백질을 보존해야 할 때 쓰는 용액입니다. PBS + 0.5 mM EDTA.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 500 µL | 0.5 mM |
| 1X PBS (Ca²⁺·Mg²⁺ 없음) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- Ca²⁺·Mg²⁺ 없는 PBS에 EDTA를 넣습니다.
- 0.22 µm 필터로 거릅니다. 실온 또는 4 °C 보관.
- 세포에 넣고 37 °C에서 5–15분 두었다가 두드려 떼어 냅니다.
알아 둘 점
- flow cytometry에서 표면 항원(trypsin에 잘리는 것)을 볼 때 좋습니다.
⚠ 안전 세포를 다루는 용액은 생물안전작업대(클린벤치) 안에서 멸균 상태로 다룹니다.
자주 묻는 질문
잘 안 떨어지는 세포는?
EDTA를 2–5 mM로 올리거나 accutase 같은 부드러운 효소를 씁니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.