Miniprep 용액 1 (재현탁, P1) 만드는 법
알칼리 용해법 plasmid miniprep의 첫 용액입니다. 세균을 풀어 두고 RNase A가 RNA를 분해합니다. 50 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM EDTA, 100 µg/mL RNase A.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 1 M Tris-HCl (pH 8.0) | 5 mL | 50 mM |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 2 mL | 10 mM |
| RNase A (DNase-free) | 10 mg | 100 µg/mL |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- Tris·EDTA를 물과 섞어 고압멸균합니다.
- 식은 뒤 RNase A를 넣습니다.
- 4 °C에 보관합니다 (약 6개월).
알아 둘 점
- 세균 침전물 1.5–5 mL 배양분에 250 µL를 넣고 덩어리 없이 풀어 줍니다.
- 옛 방법(Sambrook 용액 I)에는 50 mM 포도당이 들어가기도 합니다.
자주 묻는 질문
RNase A가 없으면?
plasmid DNA에 RNA가 섞여 농도가 부풀려 측정됩니다. 젤에서 아래쪽에 번진 띠로 보입니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.