5X M9 염 (최소 배지) 만드는 법
탄소원을 정해 줄 수 있는 대장균 최소 배지의 염 stock입니다. 동위원소 표지 단백질(¹⁵N·¹³C) 생산에도 씁니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Na₂HPO₄·7H₂O | 32 g | 239 mM (5X) |
| KH₂PO₄ | 7.5 g | 110 mM (5X) |
| NaCl | 1.25 g | 43 mM (5X) |
| NH₄Cl | 2.5 g | 93 mM (5X) |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 최종 부피의 약 80% 물에 녹입니다.
- 물로 최종 부피를 맞춥니다.
- 고압멸균(121 °C, 20분)합니다. 실온 보관.
알아 둘 점
- M9 최소 배지 1 L: 5X M9 염 200 mL + 1 M MgSO₄ 2 mL + 20% 포도당 20 mL + 1 M CaCl₂ 0.1 mL + 멸균수 (모두 따로 멸균).
- ¹⁵N 표지에는 NH₄Cl을 빼고 ¹⁵NH₄Cl(1 g/L)을 따로 넣습니다.
자주 묻는 질문
MgSO₄·CaCl₂를 함께 넣으면 안 되나요?
인산과 함께 끓이면 침전이 생기므로 멸균한 뒤 식은 배지에 넣습니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.