LB 한천 배지 (plate) 만드는 법
대장균 형질전환체를 고르는 LB plate입니다. LB에 한천 1.5%를 넣습니다. 90 mm 접시 하나에 약 20–25 mL.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Tryptone | 5 g | 1% |
| Yeast extract | 2.5 g | 0.5% |
| NaCl | 5 g | 1% |
| Agar | 7.5 g | 1.5% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 한천을 뺀 성분을 물에 녹이고 pH 7.0을 확인합니다.
- 한천을 넣고(아직 녹지 않음) 최종 부피를 맞춥니다.
- 고압멸균(121 °C, 20분)하면 한천이 녹습니다.
- 50–55 °C까지 식힌 뒤 항생제를 넣고 붓습니다.
알아 둘 점
- 굳은 plate는 거꾸로 뒤집어 4 °C에 보관합니다 (항생제 plate는 약 1개월).
- 표면 거품은 붓기 직전 버너 불꽃을 살짝 지나가게 하면 없어집니다.
자주 묻는 질문
너무 뜨거울 때 항생제를 넣으면?
ampicillin 등은 열에 분해됩니다. 손으로 병을 잡을 수 있을 정도(약 55 °C)에서 넣으세요.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.