2.5% glutaraldehyde 고정액 (전자현미경) 만드는 법
전자현미경(TEM·SEM) 시료의 미세구조를 단단히 고정하는 용액입니다. 0.1 M 인산 완충액 pH 7.4 + 2.5% glutaraldehyde.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 25% glutaraldehyde (EM 등급) | 1 mL | 2.5% |
| 0.2 M 인산나트륨 (pH 7.4) | 5 mL | 0.1 M |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 흄후드에서 인산 완충액과 물을 섞고 glutaraldehyde를 넣습니다.
- 그날 만들어 차갑게(4 °C) 씁니다.
- 시료를 1–2시간(작은 조직은 밤새 4 °C) 고정한 뒤 완충액으로 씻습니다.
알아 둘 점
- 면역형광에는 쓰지 않습니다. glutaraldehyde는 강한 자가형광을 만들고 항원을 가립니다.
- 0.1 M 카코딜산 완충액도 흔하지만 비소가 들어 있어 독성이 강합니다.
⚠ 안전 glutaraldehyde는 독성·감작성이 있습니다. 흄후드에서 장갑을 끼고 다루세요.
자주 묻는 질문
PFA와 섞어 쓰기도 하나요?
네. Karnovsky 변형(예: 2% PFA + 2.5% glutaraldehyde)은 PFA가 빨리 스며들고 glutaraldehyde가 단단히 고정합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.