DEPC 처리수 (RNase-free water) 만드는 법
RNA 실험용으로 RNase를 없앤 물입니다. 0.1% DEPC를 넣어 두었다가 고압멸균으로 DEPC를 분해합니다.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| DEPC (diethyl pyrocarbonate) | 1 mL | 0.1% (v/v) |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 흄후드에서 물에 DEPC를 넣고 세게 흔들어 섞습니다.
- 실온에서 최소 2시간(보통 밤새) 둡니다.
- 고압멸균(121 °C, 최소 15분)해 남은 DEPC를 분해합니다 (약한 과일 냄새는 남을 수 있음).
알아 둘 점
- Tris·HEPES처럼 아민이 있는 완충액은 DEPC와 반응하므로 직접 처리하지 않습니다. DEPC 처리수로 만들고 RNase-free 시약을 씁니다.
⚠ 안전 DEPC는 발암 의심 물질입니다. 흄후드에서 장갑을 끼고 다루세요.
자주 묻는 질문
시판 nuclease-free water와 차이가 있나요?
목적은 같습니다. 시판 물은 DEPC 없이 여과·검증된 것이라, 남은 DEPC가 걱정되는 효소 반응에는 시판 물이 더 안전합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.