Coomassie 염색액 (R-250) 만드는 법
SDS-PAGE 젤의 단백질을 파랗게 염색하는 고전적인 용액입니다. 0.1% Coomassie R-250, 40% 메탄올, 10% 아세트산.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| Coomassie Brilliant Blue R-250 | 500 mg | 0.1% |
| 메탄올 | 200 mL | 40% |
| 빙초산 | 50 mL | 10% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 메탄올에 Coomassie를 먼저 녹입니다.
- 아세트산과 물을 넣어 최종 부피를 맞춥니다.
- 종이 필터로 걸러 찌꺼기를 없애고 실온에 보관합니다 (여러 번 재사용 가능).
알아 둘 점
- 젤을 30분–1시간 담근 뒤 탈색액으로 배경이 투명해질 때까지 씻습니다.
- 검출 한계는 밴드당 약 50–100 ng입니다.
⚠ 안전 메탄올은 독성·인화성입니다. 환기되는 곳에서 장갑을 끼고 다루세요.
자주 묻는 질문
메탄올 없는 방법은 없나요?
콜로이드성 Coomassie G-250 방법(시판 "safe stain" 계열)은 메탄올 없이 물로 탈색합니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.