Church hybridization 완충액 만드는 법
포름아마이드 없이 Southern·Northern blot을 hybridization하는 완충액입니다. 0.5 M 인산나트륨 pH 7.2, 7% SDS, 1 mM EDTA, 1% BSA.
🧮 부피 계산기
| 성분 | 넣을 양 | 최종 농도 (1X) |
|---|---|---|
| 1 M 인산나트륨 (pH 7.2) | 50 mL | 0.5 M |
| SDS | 7 g | 7% |
| 0.5 M EDTA (pH 8.0) | 200 µL | 1 mM |
| BSA (fraction V) | 1 g | 1% |
| 물 (증류수) | 최종 부피까지 |
만드는 순서
- 인산 완충액과 물을 데우며 SDS를 녹입니다.
- EDTA와 BSA를 넣어 녹이고 최종 부피를 맞춥니다.
- 실온에 보관하고, 쓰기 전 65 °C로 데워 SDS를 녹입니다.
알아 둘 점
- 1 M 인산나트륨 pH 7.2는 1 M Na₂HPO₄와 1 M NaH₂PO₄를 약 2 : 1로 섞고 pH 미터로 맞춥니다 (진한 인산 완충액은 묽은 것보다 pH가 낮게 나오므로 비율을 표에만 의존하지 않음).
- 65 °C에서 prehybridization 1시간 → probe를 넣고 밤새 hybridization.
자주 묻는 질문
칼륨 인산으로 만들어도 되나요?
안 됩니다. 칼륨이 SDS와 만나 침전(KDS)이 생깁니다.
널리 쓰이는 표준 조성입니다. 시약의 수화물 형태·순도에 따라 양이 달라질 수 있으니 병 라벨의 분자량(FW)을 확인하고, 소속 기관의 안전 규정과 제조사 설명서를 따르세요.